兔血清總補(bǔ)體ELISA試劑盒是常用于研究免疫系統(tǒng)的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù),它是一種準(zhǔn)確、可靠、靈敏的實(shí)驗(yàn)技術(shù),在臨床和科研領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。
一、原理
ELISA是一種基于抗原-抗體反應(yīng)的檢測技術(shù),其中酶標(biāo)記的二級抗體或親和素與分子之間形成復(fù)合物,通過底物酶反應(yīng)生成熒光或吸光度信號。兔血清總補(bǔ)體ELISA試劑盒利用雙抗原夾心法檢測血清樣品中總補(bǔ)體含量。具體來說,首先將血清樣品加入含有植物血凝素的96孔板孔中固定;然后加入生物素標(biāo)記的補(bǔ)體C3抗體,與未被固定的補(bǔ)體C3結(jié)合;最后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的蛋白A,與生物素結(jié)合的抗體形成復(fù)合體。洗滌后加入底物TMB,產(chǎn)生藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物,加入停止劑停止反應(yīng),測定OD值,OD值與樣品中總補(bǔ)體含量呈正相關(guān)關(guān)系。
二、操作步驟
1、取出所需試劑和材料,標(biāo)記試板。
2、加入樣品和對照物質(zhì)。
3、加入生物素補(bǔ)體C3抗體(第一抗體)。
4、洗滌板子去除所有未結(jié)合的第一抗體。
5、加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的蛋白A(第二抗體)。
6、洗滌板子去除所有未結(jié)合的第二抗體。
7、加入底物TMB。
8、停止反應(yīng),并測定吸光度值。
三、兔血清總補(bǔ)體ELISA試劑盒具有以下優(yōu)點(diǎn):
1、靈敏度高,可以檢測到極低濃度的總補(bǔ)體。
2、準(zhǔn)確性高,結(jié)果穩(wěn)定可靠。
3、操作簡單,易于實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。
四、應(yīng)用領(lǐng)域
兔血清總補(bǔ)體ELISA試劑盒廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)和免疫學(xué)等領(lǐng)域。其中,最常見的應(yīng)用是檢測患者血清中總補(bǔ)體含量,以診斷某些自身免疫性疾病,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和其他結(jié)締組織病等。此外,該試劑盒還可以用于研究小鼠模型中的免疫反應(yīng),評估藥物對免疫系統(tǒng)的影響等方面。